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                                  農藥殘留試劑盒

                                  簡要描述:農藥殘留試劑盒
                                  農藥殘留試快速檢測ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被(Aflatoxin)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(Aflatoxin)呈正相關。

                                  • 產品型號:
                                  • 廠商性質:生產廠家
                                  • 更新時間:2023-12-07
                                  • 訪  問  量:3605

                                  詳細介紹

                                  農藥殘留試劑盒

                                  農藥殘留試劑盒

                                  ELISA試劑盒檢測原理:

                                  試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被(Aflatoxin)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(Aflatoxin)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

                                  樣品收集、處理及保存方法:

                                  1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

                                  2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

                                  3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

                                  4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

                                  5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

                                  自備物品

                                  1.酶標儀(450nm)

                                  2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

                                  3.37℃恒溫箱

                                  ELISA試劑盒操作注意事項:

                                  1、試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正?,F象,水浴加熱使結晶*溶解后再使用。

                                  2、實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

                                  3、濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,終結果乘以5才是樣本實際濃度。

                                  4、嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。

                                  5、所有液體組分使用前充分搖勻。

                                  試劑盒組成:

                                  名稱

                                  96孔配置

                                  48孔配置

                                  備注

                                  微孔酶標板

                                  12孔×8條

                                  12孔×4條

                                  標準品

                                  0.3mL*6管

                                  0.3mL*6管

                                  樣本稀釋液

                                  6mL

                                  3mL

                                  檢測抗體-HRP

                                  10mL

                                  5mL

                                  20×洗滌緩沖液

                                  25mL

                                  15mL

                                  按說明書進行稀釋

                                  底物A

                                  6mL

                                  3mL

                                  底物B

                                  6mL

                                  3mL

                                  終止液

                                  6mL

                                  3mL

                                  封板膜

                                  2張

                                  2張

                                  說明書

                                  1份

                                  1份

                                  自封袋

                                  1個

                                  1個

                                  注:標準品(S0-S5)濃度依次為:0、2.5、5、10、20、40 ppb

                                  試劑的準備:

                                  20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。

                                  洗板方法:

                                  1.手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。

                                  2.自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

                                  操作步驟:

                                  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

                                  2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

                                  3.樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

                                  4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

                                  5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

                                  6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

                                  7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

                                  結果判斷:

                                  繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

                                  試劑盒性能:

                                  1.準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

                                  2.靈敏度:檢測濃度小于1.0 ppb。

                                  3.特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

                                  4.重復性:板內、板間變異系數均小于15%。

                                  5.貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

                                  6.有效期:6個月

                                  免責聲明:

                                  試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。

                                  嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。

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